免疫沉淀解决方案

免疫沉淀(IP)是从复杂样品（如细胞裂解液或抽提物）中纯化特定蛋白的一种常用方法。传统的IP是采用固定了Protein A或Protein G的琼脂糖珠（也称为树脂）来捕获溶液中的抗原-抗体复合物。复合物继而被离心“沉淀”。这种方法在样品操作过程中比较不方便，多步漂洗和离心操作使目的蛋白得率和实验结果重现性均不甚理想；而且得到的蛋白通常没有天然活性，不能用于功能性分析。

免疫共沉淀（co-IP）是验证两种蛋白相互作用的方法，一种蛋白被特异性纯化时如果另一种蛋白也被一起纯化，说明这两种蛋白存在相互作用。其操作类似于IP，纯化中以GST、链亲和素等较常见。

默克密理博提供了不同的IP操作模式和产品，力图为您提供更多的方便并获得最理想的实验结果。

Catch and Release® 可逆免疫沉淀系统

Catch and Release® 系列IP 试剂盒采用方便的离心甩柱方法提高了IP 的操作速度、通量和重现性。其中使用的试剂使蛋白样品处于非变性条件，不仅使样品可用于下游活性功能分析，也使杂蛋白污染减少，改善了实验结果。所以Catch and Release® 试剂盒在多样品操作、下游要做活性分析等IP 应用中特别受欢迎。Catch and Release® 系列试剂盒已经应用于大量鼠或兔抗体的IP 实验，其中孵育时间比传统IP 减少，仅需30 分钟，同样得到非常好的效果。更高通量的IP 操作（一次可达96 个样品），请选用17-501 Catch and Release® v2.0 High Throughput (HT) Immunoprecipitation Assay Kit。

用Catch and Release® 试剂盒，非常方便进行免疫沉淀、纯化天然构象蛋白或变性蛋白。试剂盒已经通过许多文献的Co-IP和IP-kinase实验验证!

• 可逆：可非变性洗脱抗原：抗体复合物，IP的蛋白因此可接后续活性分析

• 背景低：特别的抗体捕获亲和配体(ACAL) 降低了非特异性结合

• 快速：最少30分钟即可完成的IP的孵育步骤

• 重复性更好：甩柱设计方便操作，并避免吸液步骤导致的样品损失

Proteome系列磁珠：轻松快捷地做免疫沉淀实验

传统的IP方法需要长达数小时的孵育，激烈的离心操作。相反，PureProteome™ 磁珠IP法不仅加强了抗原-抗体结合，操作简便快速却更温和。磁珠易于混合和重悬，磁珠与蛋白之间的互作也更加高效。

PureProteome™ Protein A和G磁珠与PureProteome™ Protein A/G　混合磁珠

PureProteome™ Protein A/G 混合磁珠由Protein A 和ProteinG 按50:50 比例混合而成，能与所有类型的哺乳动物免疫球蛋白G（IgGs）有效结合。

PureProteome™ Kappa 和 Lambda Ig Binder 磁珠：免疫沉淀各种抗体

PureProteome™ Kappa 磁珠能够非常特异地结合到人免疫球蛋白kappa 轻链恒定区上，Lambda 磁珠则以好高的特异性与人免疫球蛋白Lambda 轻链恒定区结合。这些新型的磁珠可以用于捕获所有亚型的免疫球蛋白（IgG, IgA, IgD, IgE 和IgM），成为一种简单快捷、重复性好、便于缩放的人抗体或抗体片段（带有kappa 或lambda 轻链， 例如Fab 和F(ab’ )2.）纯化的可靠方法。采用混合的PureProteome™ Kappa 和Lambda 磁珠可以去除所有人免疫球蛋白。

采用PureProteome™做IP的优点：

• 载量高、效率高：与市售其它磁珠产品相比，表面积加大使结合载量显著增加。

• 纯度更好：杂蛋白非特异性结合明显更低

• 操作快捷，节约时间：孵育时间减少而结合效果更好，孵育时间节省50% 以上

PureProteomeTM Protein G磁珠较其它市售产品IP效果更出色与传统琼脂糖珠和I 品牌磁珠相比，PureProteomeTM Protein G磁珠显著提高了蛋白产量而几乎没有结合背景。将一个约20kDa的蛋白转染进入HEK293细胞。细胞裂解液与不同体积的Protein G珠子和含有这个蛋白特异性抗体的兔血清混合。4℃孵育过夜，珠子用样品缓冲液漂洗。重悬。用Western Blotting检测珠子上捕获的蛋白。数据承蒙华盛顿大学药学院提供（西雅图，WA）。

PureProteome™ NHS 和 Carboxy FlexiBind 磁珠：又快又好地制备自己想要的磁珠

实际工作中并不是总能找到产品满足特别的研究要求，这时候就需要自己制备了。研究蛋白- 蛋白相互作用？将酶/ 核酸/ 小分子固定化？ PureProteome™ NHS 和Carboxy FlexiBind 磁珠提供了极大的便利，并按自己的要求固定化这些分子，只要这个分子上有一个游离的氨基基团就可以。

PureProteome™ NHS FlexiBind 磁珠(适合首次使用的初学者)

• 快速：60分钟内完成自制

• 简单好用：试剂盒成分齐全，包括磁珠，所需各种缓冲液以及Amicon® Ultra超滤

• 管以便去除那些没有反应的杂质

• 功能强大：不需要经验，也无需优化

  
  

PureProteome™ Carboxy FlexiBind 磁珠(适合有经验的使用者)

• 灵活：可以选择0.3 m, 1 m或2.5 m COOH等不同规格的磁珠

• 兼容自动化操作：较小的珠子有更好的浮力，磁力却仍然很强

• 更经济：价格便宜，性价比高

相对亲和力的比较